皮肤B态反应（致敏）试验仪

皮肤B态反应（致敏 ）试验仪

实验目的：

确定重复接触受试物对哺乳动物是否可引起皮肤B态反应及其程度

试验概述：  

局部封闭涂皮试验（Buehler test，BT）和豚鼠最大值试验（uinea pig maximisation test，GPMT）是实验动物通过多次皮肤涂抹（诱导接触）或皮内注射受试物10d~14d（诱导阶段）后，给予激发剂量的受试物，观察实验动物，并与对照动物比较对激发接触受试物的皮肤反应强度。

小鼠局部淋巴结分析试验（locallymph node assay，LLNA）是通过耳部给予实验动物受试物，引起淋巴结的淋巴细胞增生，淋巴细胞增生与受试物剂量（过敏程度）成比例。利用放射性标记方法，测定试验组与对照组淋巴细胞的标记率，并进行对比，获得刺激指数，评价致敏强度。

应用范围

应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域

符合标准：

GB/T 15670.9-2017《农药登记毒理学试验方法第9部分皮肤B态反应（致敏）试验》

试验步骤：

1. Buehler Test（BT） 

动物模型：豚鼠

操作步骤：

诱导阶段：通过封闭式皮肤涂抹受试物，持续10-14天。

激发阶段：间隔后再次涂抹受试物，观察皮肤反应。

观察指标：红斑、水肿等皮肤炎症反应的强度（主观评分）

优点:

模拟人类皮肤接触途径，适用于局部制剂（如化妆品、外用药物）无需注射，操作相对温和。

缺点：

敏感性较低，可能漏检弱致敏物，依赖主观评分，存在实验者偏差。

应用场景：传统化妆品、外用药品的安全性评估。

2.豚鼠最大值试验（GPMT）

动物模型：豚鼠

操作步骤：

诱导阶段：皮内注射受试物（常联合弗氏佐剂）结合皮肤涂抹，持续10-14天。

激发阶段：再次涂抹受试物，评估皮肤反应。

观察指标：与BT类似，但反应更强烈（红斑、水肿、硬结）

优点：

敏感性高，可检测强致敏物和弱致敏物；尤其适用于化学品和工业原料。

缺点：

使用佐剂可能引发过度免疫反应，导致假阳性；动物痛苦程度较高，伦理争议较大。

应用场景：

工业化学品、强致敏性物质（如染发剂、橡胶添加剂）的严格检测。

3.小鼠局部淋巴结试验（LLNA）

动物模型：小鼠

操作步骤：

诱导阶段：连续3天耳部涂抹受试物。

检测指标：通过3H-胸苷或BrdU标记增殖的淋巴细胞，计算刺激指数（SI）

观察指标：淋巴结淋巴细胞增殖程度（SI>3判为阳性）

优点:

客观定量：减少主观评分误差；

符合3R原则：动物用量少，无需激发阶段，痛苦小；

高效快速：试验周期短（约1周）。

缺点：

对某些物质（如金属盐）敏感性不足，需使用放射性物质或特殊设备，成本较高。

应用场景：欧盟等法规优先推荐的替代方法，广泛用于药品、化妆品及化工产品的初筛。

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