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体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪

  • 更新时间:  2025-04-28
  • 产品型号:  CW-Z401
  • 简单描述
  • 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪
    实验目的:
    本试验检测受试物是否引起培养的哺乳动物细胞染色体畸变,以评价受试物致突变的可能性
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体外哺乳动物细胞染色体畸变 试验仪

实验目的:

本试验检测受试物是否引起培养的哺乳动物细胞染色体畸变以评价受试物致突变的可能性

实验概述:

在加入和不加入代谢活化系统的条件下使培养的哺乳动物细胞暴露于受试物中。用中期分裂相阻断剂(如秋水仙素或秋水仙胺)处理使细胞停止在中期分裂相随后收获细胞制片染色分析染色体畸变。

大部分的致突变剂导致染色单体型畸变偶有染色体型畸变发生。虽然多倍体的增加可能预示着有染色体数目畸变的可能但本方法并不适合用于测定染色体的数目畸变。

应用范围

应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域

符合标准:

GB/T 15670.19-2017《农药登记毒理学试验方法第19部分体外哺乳动物细胞染色体畸变试验》

二、试验流程

1)细胞培养

选择合适细胞系,在含血清培养基中培养至对数生长期。

2)受试物处理

设置多个浓度组(需包括细胞毒性评估,如50%生长抑制浓度)

阳性对照(已知诱变剂)

阴性对照(溶剂对照)

3)代谢活化系统(S9混合液)

模拟体内代谢,用于检测需代谢激活的致突变物(如加Aroclor 1254诱导的大鼠肝S9

4)采样时间

短期处理1个细胞周期(通常24小时,含或不含S9

长期处理覆盖多个细胞周期(如48小时)

5)染色体制备

秋水仙素(或秋水仙胺)处理阻断中期细胞。

低渗处理(KCI溶液)使细胞膨胀。

固定(甲醇冰醋酸=31)后滴片,Giemsa染色。

6)镜检分析

显微镜下观察至少200个中期分裂相,记录畸变类型和频率。

三、仪器与试剂

关键仪器:

培养箱、生物安全柜、离心机、显微镜(配备油镜和图像分析系统)

染色体自动扫描仪(可选)

主要试剂

细胞培养基、胎牛血清。

秋水仙素、Giemsa染液、S9混合液。

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪

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